УЧАСТИЕ ГЛИКАНОВ КЛЕТОЧНЫХ СТЕНОК БАКТЕРИЙ В ФОРМИРОВАНИИ ИММУННОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ НА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КИШЕЧНИКА

Литвинова Екатерина Анатольевна1,2
Блинова Е.А.1,3, Феофанова Н.А.1,3, Барковская М.Ш. 1,3, Калмыкова Г.В.1,2, Акулова Н.И.1,2, Аржанова Е.Л.1, Бец В.Д.1,2
1 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск
2 Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий РАН, Краснообск
3 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт клинической и фундаментальной иммунологии», Новосибирск 

litvinovaea@physiol.ru

Иммунные клетки способны распознавать поверхностые гликаны бактерий. В зависимости от степени фукозилирования гликанов клеточных стенок бактерий может развиваться воспалительный ответ при воспалительных заболеваниях кишечника (ВЗК). Lactobaсillus spp., Enterococcus spp. и E.coli имеют гены фукозилтрансферазы, и могут встраивать фукозу в поверхностные гликаны. Рецептор DC-SIGN на поверхности иммунных клеток способен распозновать фукозу в составе гликанов, в результате чего происходит активация макрофагов и дендритных клеток. В свою очередь дендритные клетки могут активировать Т-клетки и запускать различные типу иммунного ответа. У трансгенной линии мышей Muc2-/-, модель ВЗК, в ткани толстой кишки развивается хроническое воспаление. Переключение воспалительной реакции на толерогенный ответ может облегчить состояние при ВЗК. Цель данного исследования - определить будут ли гликаны бактериальных стенок Enterococcus faecalis, выделенных из кишечника мышей C57BL/6, запускать процессы в дендритных клетках мышей Muc2-/-, которые активируют Т-клетки по толерогенному пути in vitro и in vivo.
Методы: Дендритные клетках (ДК) сгенерированны из костного мозга Muc2-/- мышей модель ВЗК и мышей C57BL/6. Проточной цитометрией определяли фенотип ДК до и после обработкой L-фукозой и бактериями, в клеточных стенках которых была фукоза, с использованием антител I-Ab, CD80, CD86, CD209, CD11c (BioLegend). Выделение бактерий из кишечных контентов выполняли на дифференцировочных средах с последующей идентификацией методом секвенирования гена16S рРНК. На поверхности бактерий определяли фукозилированные гликаны с помощью UEA I меченного FITC. В модели in vivo мышам Muc2-/- per os вводили суспензию E. faecalis в течение 3-х недель. У мышей определяли фенотип лимфацитов региональных лимфоузлов и тип активации макрофагов.
Результаты: Гликаны на поверхности бактерий влияли на представленность DC-SIGN и поверхностных маркеров ДК в экспериментах in vitro. DC-SIGN может влиять на активность ДК через TLR рецепторы. Активированные ДК при ко-культивировании с наивными Т-клетками будут запускать их дифференцировку в про- или противосполительный тип. Подселение E. faecalis мышам Muc2-/- снижал экспрессию внутриклеточного CD38 в макрофагах, который запускает воспалительный процесс.
Данная работа была поддержана грантом РНФ # 20-64-47020.
 

Для цитирования

Литвинова Е.А. , Блинова Е.А., Феофанова Н.А., Барковская М.Ш., Калмыкова Г.В., Акулова Н.И., Аржанова Е.Л., Бец В.Д. УЧАСТИЕ ГЛИКАНОВ КЛЕТОЧНЫХ СТЕНОК БАКТЕРИЙ В ФОРМИРОВАНИИ ИММУННОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ НА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КИШЕЧНИКА. Тезисы Девятой конференции специалистов по лабораторным животным Rus-LASA. https://doi.org/10.29296/2618723X-RusLASA2021-32

Вас может заинтересовать