РАЗРАБОТКА ЭФФЕКТИВНОЙ СТРАТЕГИИ РАЗВЕДЕНИЯ НОКАУТНЫХ МЫШЕЙ ПО ГЕНУ TPH2

Кибиткина Анастасия Анатольевна
Василевская Е.Р., Толмачева Г.С.
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный научный центр пищевых систем им. В.М. Горбатова» Российской академии наук
ankib@list.ru

Цель работы: проведение комплексной оценки репродуктивной функции, материнской заботы и развития потомства нокаутных мышей по гену TPH2, разработка успешной стратегии разведения мутантных мышей в условиях индивидуально–вентилируемых клеток
Методы: Эстральный цикл гетерозиготных нокаутных самок по гену TPH2 исследовали двумя методами: визуально и цитологически. Определяли половые предпочтения сексуально наивных и опытных самок и самцов мышей в бинарном тесте с мочевой меткой и социальные взаимодействия между однополыми конспецификами в диадическом тесте «Резидент–интрудер» [1]. Отмечали успешность бридинга после формирования гаремных групп– фертильность животных. Определяли выраженности материнской заботы путем комплексной оценки поведения самок с использованием тестов: «Гнездостроение», «Материнская агрессия», «Поисковый тест»; отмечали акты кормления и направленного каннибализма, проводили протеомный анализ молока [2]. После рождения щенков регистрировали выживаемость, оценивали физиологическое развитие – массу, отлипание ушных раковин, первичную шерсть, прорезывание резцов, открытие глаз, опускание семенников, открытие влагалища; сенсорные рефлексы – реакцию плайсинга передних и задних конечностей, двигательные рефлексы – рефлекс выпрямления, отрицательный геотаксис, мышечную силу; определяли соотношение по генотипу– гомозиготы (Ko), гетерозиготы (Het), дикий тип (Wt) [3]. 
Результаты: Нарушения в эстральном цикле самок TPH2 Het представлены более длительной стадией диэструса на 2,0–3,5 суток и, как следствие, сокращением количества циклов. Влияние генного фактора не задействовано в определении сексуальных предпочтений на основе обонятельной информации, однако самцы и самки TPH2 Het (как наивные, так и опытные) проявили значительно больший интерес к наивным особям TPH2 Het и Wt. Самки TPH2 Het не проявляли агрессивного конкурирующего поведения при парном контакте с самками TPH2 Het и Wt. Эффективность спаривания у мышей TPH2 Het была снижена на 10,3% по сравнению со средним показателем 75,0%. В материнском поведении обнаружены нарушения при возвращении щенков в гнездо, повышенный процент инфантицида и направленный каннибализм. У щенков TPH2 Het отмечена повышенная рефлексия с наличием импульсивных реакций до 15–х суток, за которыми следует полное развитие моторных и сенсорных рефлексов. Щенки Ko имели меньшую массу (на 15,6% и 16,0% – 14 сутки, на 30,1% и 26,8% – 21 сутки, на 20,8% и 21,3% – 28 сутки), чем щенки Het и Wt, остальные показатели их физиологического развития достоверно не отличались. Согласно полученным результатам, эффективны две схемы разведения нокаутных мышей по гену TPH2: для поддержания племенной колонии в соотношении Wt:Het:Ko 25:55:20 – спаривание самца Het с двумя самками Wt; для получения потомства в соотношении Wt:Het:Ko 63:36:0 – ссаживание самца Het с двумя самками Het.

1. Кибиткина А.А. и Василевская Е.Р., ЛЖНИ, 3, (2021). 2. Umemura S. and Imai S., PLoS ONE, 10(8), e0136016 (2015). 3. Heyne, G. A. and E. H. Plisch., JAALAS, 54 (4), 368-371 (2015).
 

Для цитирования

Кибиткина А.А., Василевская Е.Р. , Толмачева Г.С. РАЗРАБОТКА ЭФФЕКТИВНОЙ СТРАТЕГИИ РАЗВЕДЕНИЯ НОКАУТНЫХ МЫШЕЙ ПО ГЕНУ TPH2 . Тезисы Девятой конференции специалистов по лабораторным животным Rus-LASA. https://doi.org/10.29296/2618723X-RusLASA2021-25

Вас может заинтересовать