Вариабельность биохимических показателей крови и установление референсных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 1: крысы

Н.Г. Войтенко, кандидат биологических наук, руководитель лаборатории биохимии и гематологии,
М.Н. Макарова, доктор медицинских наук, директор,
А.А. Зуева, токсиколог

АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ»,

188663, Россия, Ленинградская обл., Всеволожский район, г.п. Кузьмоловский, ул. Заводская, д. 3, к. 245

Е-mail:  voytenko.ng@doclinika.ru

Резюме

Установление корректных референсных интервалов для лабораторных показателей актуально как в клинической практике, так и при проведении исследований на животных. Проведен ретроспективный анализ данных по 11 биохимическим показателям сыворотки крови крыс на большой выборке животных (196 самцов и 184 самки крыс, в возрасте 12–20 нед, массой 250–350 г).

Установлено, что в крови крыс наиболее часто наблюдаются  статистические выбросы среди таких показателей, как аспартатаминотрансфераза (АСТ), аланинаминотрансфераза (АЛТ), выбросы других показателей, существенно реже. Этот факт необходимо учитывать при планировании исследований, что требует увеличения числа повторностей при проведении анализа показателей.

Установлены референсные интервалы для креатинина, мочевины, АСТ, АЛТ, щелочной фосфатазы, холестерина, триглицеридов, общего белка, альбумина, глюкозы и общего билирубина. Рассчитана межиндивидуальная вариабельность по указанным биохимическим показателям. Наибольшая межиндивидуальная вариабельность (более 30%) установлена для таких показателей, как активность щелочной фосфатазы, уровень триглицеридов, глюкозы и общего билирубина.

Проведено сравнение полученных в ходе ретроспективного анализа данных с референсными интервалами биохимических показателей крови крыс различных линий из 3 крупных питомников (Charles River, Taconic и Envigo). Представленные в литературе референсные интервалы также свидетельствуют о высокой вариабельности активности ряда ферментов (в том числе щелочной фосфатазы), а также концентрации глюкозы, общего билирубина и триглицеридов в крови крыс. Рассчитанные нами референсные интервалы хорошо сопоставимы с данными, представленными в литературе.

Полученные результаты свидетельствуют о предпочтительном использовании именно ретроспективного анализа данных, который позволяет получить более корректные референсные интервалы на большей выборке животных, без ущерба для этических принципов. Сравнительный анализ межиндивидуальной вариабельности биохимических показателей крови крыс и человека демонстрирует наличие видовых различий, которые необходимо учитывать при рассмотрении результатов доклинических исследований.

Введение

Биохимический анализ крови – неотъемлемая часть доклинических исследований, проводимых на лабораторных животных. В большинстве случаев дизайн эксперимента предусматривает сравнение показателей животных из интактных и подопытных групп. Число животных в группе, как правило, не превышает 10, что, с точки зрения статистики, является малой выборкой [1]. Для заключения о наличии/отсутствии клинической значимости  наблюдаемых отклонений необходимо иметь представление о вариабельности изучаемых показателей в данной популяции животных, т.е. о значениях референсных интервалов (РИ).

В клинической практике применяют несколько способов установления РИ. Классический подход – формирование референсной группы с применением строгих правил включения и исключения, обследование и последующий расчет РИ. Это  является трудоемким и дорогостоящим процессом для медицинских учреждений, а в доклинических исследованиях еще и противоречит нормам биоэтики, так как для установления РИ в каждой половой или возрастной группе требуется не менее 120 наблюдений [2, 4]. Другой подход – апостериорный (ретроспективный) – позволяет использовать для расчета РИ результаты, ранее полученные в данной лаборатории, за определенный период времени. Также на практике прибегают к данным в справочной литературе, что в доклинических исследованиях оправдано при анализе новых или редко используемых показателей или экзотических видов лабораторных животных.

В связи с изложенным, цель нашей работы – установление референсных интервалов для основных биохимических показателей, используемых в доклинических исследованиях, и оценка частоты статистических выбросов для этих показателей. Для установления РИ  был выбран ретроспективный метод, что позволило включить в массив данных большое число животных, не нарушая при этом биоэтические принципы. Крысы являются одним из самых востребованных тест-систем. Поэтому мы рассматриваем вопрос установления  РИ биохимических показателей на примере этих животных.

Материал и методы

Для ретроспективного анализа использовали данные, полученные в нашем центре, в период проведения текущих исследований с октября 2018 по октябрь 2019 г. В массив данных включали животных  интактных групп из 26 исследований, возраст самцов и самок аутбредных крыс составлял 12–20 нед, масса тела – 250–350 г (питомник АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ», Россия). В сформированном массиве находились данные, полученные ранее от 196 самцов и 184 самок крыс. В сыворотке крови этих животных на автоматическом биохимическом анализаторе Rendom Access A-25 (Испания) были рассчитаны следующие показатели: креатинин, мочевина, аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), щелочная фосфатаза (ЩФ), холестерин, триглицериды, общий белок, альбумин, глюкоза и общий билирубин. Концентрацию общего билирубина определяли с помощью набора реактивов Вектор-Бест (Россия), остальные аналиты – с помощью наборов Bio Systems (Испания). Статистическую обработку результатов осуществляли в программе Statistica.10: статистические выбросы по методу Тьюки, вид распределения определяли по критерию Шапиро–Уилка, сравнение между животными разного пола по U-критерию Манна Уитни и t-критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение

Для устранения влияния аномальных значений из массива данных были исключены статистические выбросы, которые определяли отдельно для каждого показателя и пола животных  по методу Тьюки. Из дальнейшей работы были исключены данные, лежащие за пределами интервала (Q1–1,5•IQR)-(Q3+1,5•IQR), где Q1 и Q3 – границы 1-го и 3-го квартилей, а IQR – межквартильный интервал. В этот интервал попадали как «extremes», или жесткие выбросы, так  и «outliers», или мягкие выбросы.

После исключения выбросов массивы данных были проанализированы на соответствие действующим в центре РИ. Последние были рассчитаны с применением классического подхода, но на ограниченной выборке животных (20 голов – 10 самцов и 10 самок). Данные о доле статистических выбросов, в том числе «extremes», по каждому показателю и выходящих за пределы РИ значений представлены в табл. 1.

Таблица 1

Доли статистических выбросов и отклонений от действующих РИ

Биохимический показатель

Самцы

Самки

выброс (extremes), %

выход за пределы РИ, %

выброс, (extremes»), %

Выход за пределы РИ, %

Креатинин

1,0 (0,0)

16,0

1,6 (0,5)

18,3

Мочевина

3,6 (0,5)

0,0

0,5 (0,0)

5,5

АСТ

8,2 (1,5)

12,8

4,9 (2,2)

14,9

АЛТ

8,7 (3,6)

2,8

5,4 (4,9)

1,1

ЩФ

4,6 (0,5)

5,3

2,7 (0,5)

4,5

Холестерин

0,5 (0,0)

0,0

0,0 (0,0)

0,0

Триглицериды

4,1 (1,0)

3,2

2,2 (0,5)

2,2

Общий белок

1,5 (0,0)

6,7

1,6 (0,0)

1,1

Альбумин

0,0 (0,0)

0,5

0,5 (0,0)

1,1

Глюкоза

2,7 (0,0)

7,3

2,2 (0,0)

4,8

Общий билирубин

2,6 (0,5)

0,0

1,6 (0,5)

0,0

 

Обращает на себя внимание, что наиболее часты статистические выбросы в крови крыс таких показателей, как АСТ, АЛТ, выбросы других показателей существенно меньше. Это обстоятельство необходимо учитывать при планировании исследований, например,  увеличение числа повторностей при проведении анализа показателей, для которых частота выбросов значительна.

При сравнении действующих РИ, полученных на малой выборке (10 самцов и 10 самок) и РИ, проанализированных ретроспективно на большой выборке (196 самцов и 184 самки), наибольшие отличия наблюдались для креатинина (у 16% самцов и 18,3% самок) и для АСТ (у 12,8% самцов и 14,9% самок). Согласно рекомендациям [2], выход за пределы референсного интервала >10% вновь полученных результатов свидетельствует о необходимости пересмотра этого РИ.

С этой целью, РИ для полученных результатов в зависимости от вида их распределения рассчитывали как среднее ±1,96•стандартное отклонение (Хср±1,96SD) для нормального распределения и как промежуток 2,5–97,5 процентили (‰) для ненормального распределения. Вид распределения определяли по критерию Шапиро–Уилка. Дополнительно проводили сравнение между животными разного пола (U-критерий Манна Уитни и t-критерию Стьюдента). По критерию Манна–Уитни статически значимых отличий между самцами и самками не выявлено.

При использовании параметрической статистики (t-критерий Стьюдента) выявлено, что концентрация креатинина в крови самок статистически значимо выше, чем у самцов. В человеческой популяции концентрация этого показателя выше у мужчин, чем у женщин, т.е. наблюдается противоположенная тенденция [5, 6]. Установлено, что активность ЩФ в крови самок статистически значимо ниже по сравнению с самцами, и это совпадает с картиной, описанной для людей [7]. Также отмечено, что  активность АЛТ и концентрация глюкозы крови самок выше, концентрации холестерина, общего белка и альбумина статистически значимо ниже, чем у самцов. Полученные данные представлены в табл. 2.

Таблица 2

Референсные интервалы биохимических показателей крови крыс

Показатель

Самцы

Самки

способ расчета

РИ

способ расчета

РИ

Креатинин, мкмоль/л

Хср±1,96SD (Хср)

45,0–75,1 (60,1)

Хср±1,96SD (Хср)

44,3–84,5 (64,4)*

Мочевина, ммоль/л

2,5–97,5‰ (50‰)

3,07–7,28 (4,78)

2,5–97,5‰ (50‰)

3,10–7,77 (5,01)

АСТ, Ед/л

2,5–97,5‰ (50‰)

81–224 (122)

2,5–97,5‰ (50‰)

60–223 (136)

АЛТ, Ед/л

2,5–97,5‰ (50‰)

34–81 (53)

2,5–97,5‰ (50‰)

34–76 (46)*

Щелочная фосфатаза, Ед/л

2,5–97,5‰ (50‰)

79–287 (161)

2,5–97,5‰ (50‰)

61–235 (112)*

Холестерин, ммоль/л

Хср±1,96SD (Хср)

1,03–2,69 (1,86)

Хср±1,96SD (Хср)

1,13–2,91 (2,02)*

Триглицериды, ммоль/л

2,5–97,5‰ (50‰)

0,28–1,24 (0,66)

Хср±1,96SD (Хср)

0,24–1,08 (0,66)

Общий белок, г/л

2,5–97,5‰ (50‰)

59–78 (70)

Хср±1,96SD (Хср)

61–82 (72)*

Альбумин, г/л

Хср±1,96SD (Хср)

25–37 (31)

2,5–97,5‰ (50‰)

27–38 (33)*

Глюкоза, ммоль/л

Хср±1,96SD (Хср)

3,69–12,94 (8,31)

2,5–97,5‰ (50‰)

3,27–11,56 (7,20)*

Общий билирубин, мкмоль/л

2,5–97,5‰ (50‰)

1,14–3,7 (2,25)

Хср±1,96SD (Хср)

0,83–4,1 (2,35)

Примечание. Для данных с нормальных распределением в скобках указано среднее значение; для данных, не подчиняющихся нормальному распределению, в скобках указана медиана; * – отличия от самцов статистически значимы (t-критерий Стьюдента) при р<0,05.

В табл. 3 приводятся данные биохимических показателей крови крыс разных линий из 3 различных питомников. Перерасчет показателей в традиционных единицах в единицы системы СИ был осуществлен с помощью коэффициентов, указанных на сайте: http://unitslab.com/ru [8].

Таблица 3

Референсные значения биохимических показателей крови крыс (представлены интервалы или среднее значение)

Питомник

Ссылка

Линия

Пол

Возраст, нед.

Креатинин, мкмоль/л

Мочевина, ммоль/л

АСТ, ед./л

АЛТ, ед./л

ЩФ, ед./л

Холестерин, ммоль/л

Триглицериды, ммоль/л

Белок общ., г/л

Альбумин, г/л

Глюкоза, ммоль/л

Билирубин общ., мкмоль/л

Charles River

9, 10

CDF (Fisher)

М

8–10

27–53

80– 1001

64–940

254–484

1,6–2,5

1,6–6,7

61–79

35–43

9,6–22,5

3,4–12,0

Ж

18–53

77– 969

45–473

187–334

2,2–3,6

1,0– 3,8

60–82

35–45

7,3–19,3

3,4–15,4

Lewis

М

8–10

35–62

68–710

46–551

247–535

1,8–3,1

1,3–5,5

57–82

31–43

9,5–25,7

3,4–10,3

Ж

27–62

81–879

35–293

112–346

1,9–3,4

0,8–2,9

59–80

34–47

8,0–24,0

1,7–12,0

24

CD

8–10

83,0

36,0

713,0

3,3

1,5

62

23

11

Crl:CD(SD) outbred

М

8–12

44–53

87–114

28–40

136–188

1,4–1,9

0,7–1,1

59–66

33–46

6,2–9,8

1,7–17,1

Ж

44–53

85–123

25–36

90–147

1,7–2,3

0,5–0,8

61–70

35–51

6,3–10,3

3,4–17,1

12

Crl:WI(Han) outbred

М

8–16

18–44

2,0– 4,1

74–143

18–45

62–230

1,0–2,2

0,2–1,3

52–71

34–48

3,9–11,5

0,9–2,6

Ж

18–53

2,2– 4,5

65–203

16–48

26–147

0,6– 1,9

0,2–0,5

55–77

36–55

4,2–9,7

0,9–3,1

Taconic

13

Fisher inbred

М

-

26,5

45,0

66

4,3

1,7

Ж

-

26,5

38,0

67

5,1

1,7

14

Lewis inbred

М

-

26,5

36,0

269,0

65

4,9

1,7

Ж

-

26,5

 

 

36,0

148,0

60

4,8

1,7

15

Spraque Dawley outbred

М

-

26,5

29,3

227,7

64

4,6

1,7

Ж

-

26,5

22,5

142,5

67

5,2

1,7

16

Wist@Tac (GALAS) outbre

М

21

26,5

65,0

22,0

71

1,7

1,0

72

48

6,8

1,7

Envigo

19, 20

Spraque Dawley, outbred

М

6–8

17,7

117,8

68,0

309,2

3,2

63

31

18,4

1,7

Ж

26,5

120,3

70,1

209,6

3,2

67

36

17,3

5,1

21, 22

Wistar Han outbred

 

М

6–8

 

17,7

121,3

67,0

260,6

2,2

65

33

16,9

1,7

Ж

17,7

134,9

62,5

155,9

1,7

65

35

14,4

3,4

17, 18

Wistar outbred

М

7–8

17,7

131,0

76,1

237,1

2,5

59

29

8,9

1,7

Ж

26,5

105,7

64,3

112,5

2,0

63

33

6,8

3,4

23

Lewis inbred

М

11–12

44,2

29,9

90,7

169,4

1,7

1,0

62

37

4,7

6,8

#

25

Белые крысы

М

35±3,8

5,3±0,5

95,1±5,7

47±7,7

111,5±11,2

2,4±0,3

71±2,2

31±1,7

2,4±0,3

1,0±0,06

Примечание. «–» – отсутствие сведений в литературном источнике; «#» – Виварий ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии.

Наиболее близкие значения креатинина к установленным нами РИ оказались у крыс линии Crl:CD(SD) outbred в возрасте 8–12 нед (питомник Charles River).

Обращает на себя внимание, что уровень мочевины оценивается довольно редко, из 3 доступных литературных источников наиболее близкие значения установлены для беспородных крыс (питомника Envigo). Однако уровень мочевины у линейных животных из питомника Charles River также сопоставим с полученными нами РИ.

По показателю АСТ установленные нами РИ были сравнительно невелики (у самцов – 81–224, у самок – 60–223 ед./л).  При сравнении полученных РИ с данными по разным линиям в питомнике Charles River обращает на себя внимание то, что нижняя граница интервала практически всегда совпадает, однако верхняя граница интервала значительно изменяется в зависимости от возраста животных. У животных из питомника Taconic подробных данных по этому показателю нет, а в питомнике Envigo у разных линий, разных возрастов получены очень близкие значения, укладывающиеся в наши РИ, за исключением линии Lewis inbred.

По показателю АЛТ при сравнении полученных РИ с данными по разным линиям в питомнике Charles River, наблюдалась примерно схожая картина. Нижняя граница интервала чаще несколько выше, чем установленный нами РИ, а верхняя граница интервала значительно изменяется в зависимости от возраста животных, и в возрасте 8–12 нед практически у всех линий данный показатель ниже, чем установленные нами РИ.

У животных из питомника Taconic представленные значения совпадают с полученными нами нижними границами РИ, а в питомнике Envigo представленные значения были ближе к верхним границам РИ.

По показателю ЩФ при сравнении полученных РИ с данными по разным линиям в питомнике Charles River наблюдается зависимость от возраста; показатели существенно изменялись, аналогично предыдущим двум показателям. В возрасте 8–16 нед так же, как и в наших РИ более высокие значения показателя были у самцов, показатели у животных разных линий примерно укладывалось в установленные нами РИ.

В питомниках Taconic и Charles River у животных разных линий колебания уровня ЩФ наблюдаются в существенных диапазонах, но в целом укладываются в установленные нами РИ.

Интересно также отметить, что значения активности ЩФ у самцов, как в наших РИ, так и у животных  трех питомников, несколько выше, чем у самок.

Существенных колебаний проанализированных данных, полученных из всех питомников и по всем линиям животных, в сравнении с установленными нами РИ по показателю холестерин не наблюдалось, так же как и по показателю триглицериды, тем не менее РИ у молодых животных несколько шире (см. табл. 3).

Интересно отметить крайне низкую вариабельность показателя общий белок и альбумин, как во всех питомниках, так и у всех представленных в таблице трех линий, а также их хорошую сопоставимость с полученными нами РИ.

По уровню глюкозы и билирубина при сравнении полученных РИ с данными по разным линиям в питомнике Charles River, обращает на себя внимание то, что интервалы практически у всех линий довольно высоки и значительно изменяются в зависимости от возраста животных. Полученные нами РИ хорошо сопоставимы с РИ у животных в возрасте 8–16 нед. У животных из питомника Taconic данные от линии к линии достаточно однотипны, и по средним величинам несколько ниже, чем в нашем исследовании. В питомнике Envigo отмечается высокий уровень глюкозы у линий Spraque Dawley, outbred и Wistar Han outbred, при этом у остальных линий получены значения, сопоставимые с нашими РИ.

Для каждого показателя были рассчитаны коэффициенты вариации (CV=SD/Хср•100%), что в грубом приближении соответствует межиндивидуальной вариабельности этих показателей в человеческой популяции. Сравнительные данные приведены в табл. 4.

Таблица 4

Вариабельность биохимических показателей крови крыс в сопоставлении
со справочными данными для людей [3]

Показатель

CV (крысы, собственные данные)

CVG  (люди, [3])

Креатинин, мкмоль/л

14,4

12,9

Мочевина, ммоль/л

22,5

18,3

АСТ, Ед/л

29,0

17,9

АЛТ, Ед/л

23,3

41,6

Щелочная фосфатаза, Ед/л

34,0

35,6

Холестерин, ммоль/л

22,6

15,2

Триглицериды, ммоль/л

34,3

37,2

Общий белок, г/л

7,2

4,0

Альбумин, г/л

9,4

4,2

Глюкоза, ммоль/л

31,2

7,7

Общий билирубин, мкмоль/л

34,7

30,5

 

Можно отметить сходную с людьми вариабельность по большинству исследованных показателей (см. табл. 4). Обращает на себя внимание «обратная картина» по вариабельности активности аминотрансфераз: у людей активность АЛТ изменяется в значительно более широком диапазоне, чем у крыс, в то время как показатели активности АСТ и концентрации глюкозы демонстрируют обратную тенденцию. Кроме того, в абсолютных значениях активность АЛТ в крови крыс сопоставима с таковой у человека (до 41 Ед/л), а активность АСТ в крови крыс может превышать аналогичный показатель у людей в 3 и более раз.

Заключение

Представленные результаты подтверждают актуальность периодического пересмотра референсных интервалов и свидетельствуют о предпочтительном использовании именно ретроспективного анализа данных, который позволяет получить более корректные референсные интервалы на большей выборке животных, без ущерба для этических принципов. Анализ полученных нами референсных интервалов в сравнении с данными у животных из разных питомников и разных линий показал хорошую сопоставимость данных, что служит дополнительным подтверждением удовлетворительности полученных рефересных интервалов.  Сравнительный анализ межиндивидуальной вариабельности биохимических показателей крови крыс и человека демонстрирует наличие видовых различий, которые необходимо учитывать при рассмотрении результатов доклинических исследований.

Вклад авторов: Н.Г. Войтенко – сбор и анализ данных, концепция и дизайн исследования, написание и редактирование статьи. М.Н. Макарова – идея исследования, редактирование текста статьи. А.А. Зуева – сбор данных из литературных источников, редактирование текста статьи

Список литературы

  1. Теория статистики: учебное пособие. Л.Г. Батракова. М.: КНОРУС, 2016; 528 [Teoriya statistiki: uchebnoe posobie / L.G. Batrakova. M.: KNORUS, 2016. 528 p. (in Russ.)].
  2. ГОСТ Р53022-3–2008. Технологии лабораторные и клинические. Требования к качеству лабораторных исследований. Правила оценки клинической эффективности лабораторных тестов. М., 2008. [GOST R53022-3–2008. Tekhnologii laboratornye i klinicheskie. Trebovaniya k kachestvu laboratornyh issledovanij. Pravila ocenki klinicheskoj effektivnosti laboratornyh testov. M., 2008 (in Russ.)].
  3. ГОСТ Р 53022.2–2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 2. Оценка аналитической надежности методов исследования (точность, чувствительность, специфичность) М., 2008. [GOST R 53022.2–2008 Tekhnologii laboratornye klinicheskie. Trebovaniya k kachestvu klinicheskih laboratornyh issledovanij. CHast' 2. Ocenka analiticheskoj nadezhnosti metodov issledovaniya (tochnost', chuvstvitel'nost', specifichnost') M., 2008. (in Russ.)].
  4. Horowitz G.L., Altaie S., Boyd J.C., Ceriotti F., Garg u., Horn P., Pesce A., Sine H.E., Zakowski J. Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 3-rd Ed. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2008, 28(30): 1–59.
  5. Mazzachi B.C., Peake M.J., Ehrhardt V. Reference range and method comparison studies for enzymatic and Jaffé creatinine assays in plasma and serum and early morning urine. Clinical laboratory. 2000, 46 (1–2): 53–5.
  6. Junge W., Wilke B., Halabi A., Klein G. Determination of reference intervals for serum creatinine, creatinine excretionand creatinine clearance with an enzymatic and a modified Jaffé method. Clinica Chimica Acta. 2004, 344 (1–2): 137–48. DOI: 10.1016/j.cccn.2004.02.007
  7. Burtis C.A., Ashwood E.R., Bruns D.E. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics 4th Edition. MO: Elsevier Saunders, 2005: 2448 p. DOI: 10.1373/clinchem.2005.062638
  8. Конвертация традиционных единиц измерения используемых в лабораторной и медицинской практике в единицы международной системы СИ. URL: http://unitslab.com/ru
  9. CDF (Fisher) rat hematology and biochemistry. URL: https://www.criver.com/sites/default/files/resources/rm_rm_r_CDF_Fisher_Rat_clinical_pathology_data.pdf
  10. Lewis rat hematology and biochemistry. URL: https://www.criver.com/sites/default/files/resources/rm_rm_r_Lewis_Rat_clinical_pathology_data.pdf
  11. Clinical laboratory parameters for Crl:CD(SD) Rats. URL: https://www.crj.co.jp/cms/pdf/info_common/50/8250933/rm_rm_r_clinical_parameters_cd_rat_06.pdf
  12. Clinical laboratory parameters for Crl:WI(Han) Rats. URL: https://www.criver.com/sites/default/files/resources/rm_rm_r_Wistar_Han_clin_lab_parameters_08.pdf
  13. Fisher 344 Inbred. Phenotypic data. URL: https://www.taconic.com/rat-model/fischer-344
  14. Lewis Inbred. Phenotypic data. URL: https://www.taconic.com/rat-model/lewis
  15. Sprague Dawley outbred. Phenotypic data. URL: https://www.taconic.com/rat-model/sprague-dawley
  16. Wist@Tac (GALAS) Outbred https://info.taconic.com/hs-fs/hub/355513/file-2458727415-pdf/Technical_Library/Wistar_Hannover_data.pdf
  17. Wistar. Hsd:WI. 7-8 weeks old, Males. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/wistar-7-8-wk-males-cbc.pdf
  18. Wistar. Hsd:WI. 7-8 weeks old, Females. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/wistar-7-8-wk-females-cbc.pdf
  19. Sprague Dawley. Hsd:Sprague Dawley®SD®. 6-8 weeks old, Males. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/sprague-dawley-6-8-wk-males-cbc.pdf
  20. Sprague Dawley. Hsd:Sprague Dawley®SD®. 6-8 weeks old, Females. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/sprague-dawley-6-8-wk-females-cbc.pdf
  21. Wistar Han. RccHan®:WIST. 6-8 weeks old, Males. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/rcchan-wist-6-8-wk-males-cbc.pdf
  22. Wistar Han. RccHan®:WIST. 6-8 weeks old, Females. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/rcchan-wist-6-8-wk-females-cbc.pdf
  23. Lewis. LEW/SsNHsd. 11-12 weeks old, Males. URL: https://www.envigo.com/resources/data-sheets/lewis-11-12-wk-males-cbc.pdf
  24. Caisey J.D., King D.J. Clinical chemical values for some common laboratory animals. Clinical Chemistry. 1980, 26 (13): 1877–9.
  25. Близнецова Г.Н., Брюхова И.В. Влияние препарата «Прималакт» на гематологические и биохимические показатели крови лабораторных животных. Вестник Воронежского государственного аграрного университета. 2013, Т. 4: 233–5. [Bliznecova G.N., Bryuhova I.V. Vliyanie preparata primalakt na gematologicheskie i biohimicheskie pokazateli krovi laboratornyh zhivotnyh. Vestnik Voronezhskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2013, T. 4: 233–5 (in Russ.)].

Вас может заинтересовать